免疫共沉淀技术(Co-IP),详细protocol!
Co-IP实验要点:二、免疫沉淀1.取1mg蛋白样品,用裂解液稀释到1ml2.加入40ul protein G agrose,1ug IgG,在4℃旋转混合2h,然后用4℃离心机1000g离心5min,取上清,以去除非特异性的结合。3.加入2ug的一抗,40ul protein G agrose,在4℃旋转混合过夜。4.用4℃离心机12000g离心1min,弃上清。5.用1ml裂解液重悬beads,用4℃离心机1000g离心5min,弃上清,反复清洗5次。6.用4℃离心机12000g离心1min,弃上清7.加入20-40u11XSDS-PAGE(碧云天和SantaCruz)电泳上样缓冲液,Vortex